 10. Изучение действия веществ на организм в условиях подострого опыта
Подострые опыты могут проводиться с целью: - выявления различными методами способности веществ к кумуляции; - получения данных для обоснования класса опасности вещества, необходимости оценки хронической токсичности, выбора доз и тестов при планировании хронического опыта. Подострый эксперимент является центральным звеном в гигиенических исследованиях, от его результатов зависит решение вопроса о необходимости и целесообразности дальнейших исследований вещества и их планирование. В условиях подострого опыта могут оцениваться и продукты трансформации веществ 3 и 4 классов стабильности в случае, если они не изучались ранее или химически не идентифицированы, а в острых экспериментах оказались токсичнее исходного соединения. 10.1. Наибольшую информативную ценность представляет подострый эксперимент, направленный на установление параметров токсикометрии в условиях, вызывающих не явные признаки нарушения жизнедеятельности организма, а изменения функциональных показателей, близкие к пороговым (в отличие от методов оценки кумуляции Ю.С. Кагана и В.В. Станкевича: Lim et al; Б.М. Штабского, использующих дозы, приводящие к смертельному эффекту). Подострый эксперимент позволяет: - изучить токсикодинамику в рамках зависимости "доза-эффект" во времени; - определить характер (механизм) токсического действия; наиболее поражаемые функции, органы, системы организма; - установить пороговую дозу подострого эксперимента (ПДпэк); - выявить способность вещества к кумуляции; - рассчитать зону кумулятивного действия; - установить класс опасности по кумуляции; - прогнозировать пороговую дозу хронического действия (ПДхр.). 10.1.1. В эксперименте изучается не менее 3 доз вещества. Выбор доз осуществляется на основе прогноза ПДхр. и МНД с использованием математических моделей согласно п. 3.2.2, а также результатов определения Limac (раздел 9) [1, 4]. Шаг между дозами определяется кумулятивностью вещества: 3 - 5-кратный - для 3 - 4 классов, 5 - 10-кратный для 1 - 2 классов кумуляции. 10.1.2. Исследования проводятся, как правило, на белых крысах. При выраженных (более 5 раз) различиях в видовой чувствительности обязательны дополнительные исследования на наиболее чувствительном виде животных. Вид подопытных животных определяется также особенностью биологических эффектов изучаемого вещества. Например, для изучения аллергенного эффекта используются морские свинки, для выявления мутагенного эффекта - специальные линии белых мышей, определения влияния на микрофлору кишечника - белые крысы и т.п. 10.1.3. Вещества вводятся в виде водного раствора внутрижелудочно (белые крысы) или перорально (кролики, морские свинки). Допустимо введение веществ в растительном масле или растворе крахмала. Если вещество хорошо растворяется в воде и не вызывает изменения ее органолептических свойств, предпочтительнее использовать автопоилки с ежедневным определением количества выпитого раствора. При понижении водопотребления по сравнению с контрольными животными следует переходить на активное запаивание (внутрижелудочное введение). Введение веществ ежедневное, включая выходные дни. 10.1.4. Длительность опыта - не менее 30 дней. Однако опыт может быть продлен до 2 - 3 месяцев, если известно, что изучаемый препарат вызывает изменение замедленно реагирующих систем, например, липидного обмена, костной системы, обмена кальция и т.п. 10.1.5. Точность и надежность обоснования гигиенического норматива в основном определяется адекватностью функциональных показателей, выбранных для оценки состояния организма животных в подостром (а затем в хроническом) эксперименте. Поскольку невозможно рекомендовать универсальный перечень таких показателей в силу специфичности действия отдельных веществ на организм, комплекс изучаемых показателей должен быть тщательно обоснован в каждом подостром эксперименте. Выбор показателей осуществляется с учетом всех имеющихся данных о механизме токсического действия вещества и его структурных аналогов [5, 6, 7, 8]. Желательно, чтобы выбранные показатели отражали состояние крови, печени, почек, центральной нервной системы, функции наиболее поражаемых органов. После снятия фоновых значений показателей наблюдения проводятся на 5 - 10 - 20 и 30 сутки опыта. Если не определялся порог однократного действия, необходимо исследование в 1 сутки. Если продолжительность опыта превышает 30 дней, последующие снятия значений показателей функционального состояния организма животных проводятся каждые 2 недели. 10.1.6. В подостром опыте применяются дополнительные функциональные (физическая, термическая и т.п.) или материальные (амидопириновая, гексеналовая и т.п.) нагрузки; однократно в конце опыта или через каждые 2 недели. Нагрузка должна в наибольшей мере соответствовать механизму действия вещества. Наиболее предпочтительна нагрузка изучаемым веществом в конце эксперимента в дозах, превышающих порог однократного действия в 2 - 5 раз в зависимости от способности к кумуляции.
| 
