9. Порог вредного действия при однократном поступлении вещества в организм

Цели исследований:

- определить верхний предел доз для подострого эксперимента и оптимальное время наблюдения после введения вещества;

- получить характеристику кумулятивных свойств;

- при необходимости - изучить токсикокинетику и процесс детоксикации вещества;

- рассчитать зону острого действия.

9.1. Порог однократного действия определяется на белых крысах по интегральным и специфическим показателям с обязательным определением изменений в динамике в течение суток (или нескольких суток - в зависимости от TL50). Время первого определения устанавливается исходя из клинической картины отравления в остром опыте, но не позднее двух часов, затем, например, через 4 - 6 - 12 - 24 часа после затравки, а также через 2 - 4 и 8 дней после нее. Возможны и другие сроки наблюдения с учетом токсикодинамики и/или токсикокинетики. Порог однократного действия может быть установлен эмпирически или рассчитан как вероятностная величина (Limac) или дополнен результатами токсикокинетических исследований.

9.2. Для специальных научных целей можно определить кинетику накопления и выведения вещества и/или его метаболитов в организме.

9.3. На основании исследования зависимости "время - эффект" можно определить время полуубыли (тау) регистрируемого эффекта по формуле: 

Еi - среднее значение степени эффекта (в % к параллельному контролю) в моменты времени ti (i - 1; 2; ...; n);
0,693 - натуральный логарифм из 2;
2,3 - коэффициент перехода от натуральных логарифмов к десятичным.

Степень кумуляции определяют по величине тау: при тау < 12, 12 - 24, 24 - 48 и > 48 часов кумулятивные свойства оценивают как слабые, средние, сильные и очень выраженные соответственно.

9.4. Пример определения пороговой дозы однократного действия в опыте с ацетонциангидрином (АЦГ).

При выборе доз и сроков наблюдения исходили из результатов острого опыта:

ЛД50 = 18,5 (16,9:20,3) мг/кг, TL50 = 85 мин. Первые признаки отравления появлялись через 10 - 15 мин. после введения ацетонциангидрина. Эти данные свидетельствуют о быстром развитии токсического процесса и слабо выраженной кумуляции.

Поэтому выбран минимальный интервал между дозами. Вещество вводилось однократно белым крысам в дозах, составляющих 1/5, 1/10, 1/15, 1/20 и 1/45 DL50. Отбор исследуемого материала /кровь, печень/ производили через 15, 30 мин., 1, 2, 4 и 6 часов после введения АЦГ. Контролем служили интактные животные. Поскольку механизм токсического действия цианидов хорошо известен, исследовались только специфические показатели: содержание оксигемоглобина и роданидов в крови, активность цитохромоксидазы печени. Установлено, что максимальный токсический эффект (пик содержания оксигемоглобина и снижение активности цитохромоксидазы) для доз 1/5, 1/10, 1/15 DL50 наблюдается через 30 мин. после введения вещества, а с уменьшением дозы (1/20, 1/45 DL50) срок достижения наибольших изменений увеличивается до 1 часа. Получены кривые зависимости "время - эффект" для разных доз.

По наиболее чувствительному показателю (изменению активности цитохромоксидазы) установлен порог однократного действия Limac, равный 1/45 DL50 (0,41 мг/кг). Зона острого действия DL50/Limac = 45. Это доказывает, что способность АЦГ к кумуляции слабо выражена.

Исходя из полученных данных для подострого эксперимента были выбраны дозы < Limac, т.е. 0,4; 0,08; 0,015 мг/кг с пятикратным шагом между ними.

www.newchemistry.ru